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顯微鏡實驗方法和技術(shù)知識點整理
一、實驗方法
1.顯微觀察法:如“觀察細胞有絲分裂”、“觀察葉綠體和細胞質(zhì)流動”、“用顯微鏡觀察多種多樣的細胞”等。
2.觀色法:如“生物組織中還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定”、“觀察動物毛色和植物花色的遺傳”、“DNA和RNA的分布”等。
3.同位素標記法(元素示蹤法):如“噬菌體浸染細菌的實驗”、“恩格爾曼實驗”等。
4.補充法:如用飼喂法研究甲狀腺激素,用注射法研究動物胰島素和生長激素,用移植法研究性激素等。
二、實驗技術(shù)
1.光學顯微鏡的使用:包括顯微鏡的取送、放置、旋轉(zhuǎn)、對光(反光鏡及光圈的使用)、低倍觀察、高倍觀察、鏡頭的擦拭;顯微鏡的放大倍數(shù)(是物體的長和寬,不是面積,也不是體積)、焦距問題、物鏡離裝片的遠近、準焦螺旋的使用、顯微鏡使用時物象移動方向、顯微鏡使用時異物的判斷(通常通過移動玻片、轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器或旋轉(zhuǎn)目鏡來判斷)。
2.臨時裝片、切片和涂片的制作:適用于顯微鏡觀察,凡需在顯微鏡下觀察的生物材料,必須先制成臨時裝片、切片和涂片,如“觀察植物細胞的質(zhì)壁分離和復原”中要制作洋蔥表皮細胞的臨時裝片,在“生物組織中脂肪的鑒定”中要制作花生種子的切片,在“觀察動物如人體血液中的細胞”中要制作血液的涂片等等。
3.研磨,過濾:適用于從生物組織中提取物質(zhì)如酶、色素等,要求學生熟練掌握研磨、過濾的方法,如研磨時要先將生物材料切碎,然后加入摩擦劑(常用二氧化硅)、提取液和其它必要物質(zhì),充分研磨之后,往往要進行過濾,以除去渣滓,所用過濾器具則根據(jù)需要或根據(jù)試題中提供的器材加以選用,如可用濾紙、紗布、脫脂棉、尼龍布等。
4.解離技術(shù):適用于破壞細胞壁,分散植物細胞,制作臨時裝片。
5.恒溫技術(shù):適用于有酶參加的生化反應(yīng),一般用水浴或恒溫箱,根據(jù)題目要求選用。
6.層析技術(shù):適用于溶液中物質(zhì)的分離。主要步驟包括制備濾紙條、劃濾液細線、層析分離等。
7.植物葉片中淀粉的鑒定:適用于光合作用的有關(guān)實驗,主要步驟包括饑餓處理、光照、酒精脫色、加碘等。
8.根尖培養(yǎng)技術(shù):有絲分裂實驗的材料
9.小動物飼養(yǎng)技術(shù):飼養(yǎng)小白鼠等實驗動物
10.無土栽培技術(shù):用于植物必需元素與非必需元素的鑒定
11.微電流測量技術(shù):用于刺激神經(jīng)元細胞時,興奮的傳遞情況。刺激神經(jīng)元的某一點時,相對于該神經(jīng)元的刺激點而言,其兩側(cè)均有電位變化(用兩表則可在兩側(cè)任意位置,用一表測定則相對于受刺激點不等距位置有兩次偏轉(zhuǎn))可證明在同一神經(jīng)元內(nèi)具有雙向傳遞性;刺激突觸前神經(jīng)元時,突觸后神經(jīng)元可測得電位變化,刺激突觸后神經(jīng)元時,突觸前神經(jīng)元測不到電位變化,可證明突觸傳遞具有單向傳遞性。
12.pH控制技術(shù):利用緩沖液調(diào)節(jié)pH,確保實驗環(huán)境的pH相對穩(wěn)定。
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