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關于生物技術綜合實驗報告（通用10篇）
在我們平凡的日常里，報告與我們的生活緊密相連，報告包含標題、正文、結尾等。相信許多人會覺得報告很難寫吧，下面是小編整理的關于生物技術綜合實驗報告，希望能夠幫助到大家。
生物技術綜合實驗報告 1
研究背景
谷胱甘肽(glutathione, GSH) GSH具有多種重要生理功能, 抗自由基和抗氧化應激作用, 保護細胞膜的完整性等。γ-GCS是植物細胞中GSH生物合成的限速酶, 可以調控GSH的生物合成量。GSH在生物體抵御冷害、干旱、重金屬、真菌等脅迫過程中起著重要作用, 說明γ-GCS也與植物抗逆過程密切相關。
實驗一 甘薯葉片RNA提取
一、實驗目的
1.了解真核生物RNA提取的原理；
2.掌握Trizol提取的方法和步驟。
二、實驗原理
Trizol 試劑是由苯酚和硫氰酸胍配制而成的單相的快速抽提總RNA的試劑，在勻漿和裂解過程中，能在破碎細胞、降解細胞其它成分的同時保持RNA的完整性。TRIzol的'主要成分是苯酚。苯酚的主要作用是裂解細胞，使細胞中的蛋白，核酸物質解聚得到釋放。苯酚雖可有效地變性蛋白質，但不能完全抑制RNA酶活性，因此TRIzol中還加入了8－羥基喹啉、異硫氰酸胍、β-巰基乙醇等來抑制內源和外源RNase（RNA酶）。0.1%的8－羥基喹啉可以抑制RNase，與氯仿聯(lián)合使用可增強抑制作用。異硫氰酸胍屬于解偶劑，是一類強力的蛋白質變性劑，可溶解蛋白質并使蛋白質二級結構消失，導致細胞結構降解，核蛋白迅速與核酸分離。β-巰基乙醇的主要作用是破壞RNase蛋白質中的二硫鍵。在氯仿抽提、離心分離后，RNA處于水相中，將水相轉管后用異丙醇沉淀RNA。用這種方法得到的總 RNA中蛋白質和DNA污染很少。
三、實驗材料
1.材料
甘薯（Ipomoea batatas Lam）葉片，品種為徐薯18
2.試劑
① 無RNA酶滅菌水：加入0.01%的DEPC，處理過夜后高壓滅菌；
�、� Trizol試劑；
�、� 氯仿；
④ 異丙醇、75％乙醇；
�、� TBE緩沖液；
⑥ 上樣緩沖液（6×）
3.儀器
高壓滅菌鍋、微量移液器、臺式離心機、超凈工作臺、電泳儀、電泳槽、凝膠成像系統(tǒng)、1.5mL塑料離心管、槍頭和EP管架
四、實驗方法
1.將葉片取出放入研缽中，加入適量液氮，迅速研磨成粉末，每50-100 mg植物葉片加入1 mL Trizol試劑，室溫放置5 min，使樣品充分裂解；
2.每1 mL Trizol試劑加入200 μL氯仿，用手劇烈振蕩混勻后室溫放置3-5 min使其自然分相；
3.4℃ 12,000 rpm 離心15 min，吸取上層水相轉移到新管中；在上清中加入等體積冰冷的異丙醇，室溫放置15 min；
4.4℃ 12,000 rpm 離心10 min，棄上清，RNA沉淀于管底；
5.RNA沉淀中加入1 mL 75%的乙醇（用RNase-free水配制），溫和震蕩離心管，懸浮沉淀； 4℃ 8,000 rpm離心2 min，棄上清；
6.室溫放置10 min晾干沉淀；
7.沉淀中加入20μL RNase-free ddH2O，輕彈管壁，以充分溶解RNA，-70℃保存；
8.用1%的瓊脂糖凝膠電泳進行檢測，用EB染色并照相。
五、實驗結果
1.RNA提取結果
依照Trizol 試劑盒方法，提出的RNA較少，此部分未以圖或數據顯示。
2.RNA后電泳結果
其中9a為本組實驗結果。由圖可知RNA條帶非常模糊，拖尾現象嚴重，幾乎無法分清具體條帶，亮度較大。點樣孔附近的紅色部分為雜質，在提取過程中并未很好除去。
RNA提取跑膠結果。其中1泳道為樣品Marker，9a泳道為本小組RNA樣品。與標準對照可見條帶模糊，拖尾現象嚴重。
六、分析與討論
1.RNA的提取
產量并不多，可能是因裂解樣品不充分或RNA沉淀未完全溶解所致。在實驗過程中，由于對操作時間的掌握不熟練、操作技巧不完善，留上清與棄上清時令RNA損失了部分，使最終RNA產量不理想。
2.RNA電泳結果
有EB存在時，電泳后28S rRNA和18S rRNA在紫外燈下應看得很清楚，另出現條由tRNA，5.8S rRNA和5S rRNA組成的較模糊、遷移較快的帶。如果RNA沒有降解，則28S rRNA的亮度應為18S rRNA的2倍，且這兩條帶都無彌散現象發(fā)生。由圖1.9a可知，RNA拖尾現象嚴重，說明RNA已大部分被降解；此外點樣孔附近出現紅色部分雜質，分析可能有并未除盡的蛋白質，同樣影響RNA電泳結果。
在進行實驗時，本小組成員未嚴格戴上口罩并勤換手套，這可能使外源RNAase進入樣品，導致其降解嚴重。另外，提取出RNA后本小組未立即將樣品放入-70℃保存，也為導致結果不理想的重要原因之一。在最初用氯仿萃取分層的過程中，由于水相吸取過多，摻雜入部分蛋白質雜質而未于后續(xù)純化步驟除盡，RNA條帶拖尾嚴重可能還受該蛋白質影響。
七、總結：
本次試驗RNA提取非常失敗，從跑膠結果可見其降解嚴重。雖然大實驗無法避免試劑交叉污染的可能性，且電泳用膠的質量也會影響實驗結果，但從圖1.2a，3a，2b等條帶較為清晰的小組實驗結果可知，瓊脂糖凝膠質量以及試劑對結果干擾不大。那么本小組成員在提取過程中的操作一定出現了很大失誤。首先口罩、手套應該嚴格按規(guī)定佩戴，提取過程對移液槍等儀器使用需謹慎仔細，盡量避免混入雜質。其次為排除部分雜質影響可對RNA樣品用紫外線分光光度計測定吸光值檢驗，將有助于結果分析。最后，細節(jié)決定成敗，我們應汲取教訓避免接下來的實驗出現類似問題。
實驗二 第1鏈cDNA的合成和模板的驗證
一、實驗目的
1.掌握第1鏈cDNA的合成方法和步驟
二、實驗原理
真核生物基因多為斷裂基因，編碼區(qū)不連續(xù)，需經轉錄后加工才能成為成熟mRNA。以真核成熟mRNA為模板合成cDNA，進而獲得有連續(xù)氨基酸編碼的DNA序列，無需轉錄后加工，即可在原核細胞中表達。
真核生物的mRNA都有PolyA尾巴。引物：Oligo dT（12-18個T）。莫洛尼
氏鼠白血病毒逆轉錄酶（M-MLV ）以單鏈RNA為模板，在引物的引發(fā)下合成與模板互補的DNA鏈（cDNA）。
mRNA 反轉錄生成的cDNA可作為PCR的模板進行擴增稱為RT-PCR，RT-PCR比Northern雜交更靈敏，對RNA的質量要求較低，操作簡便，它是在轉錄水平上檢測基因時空表達的常用方法。
三、實驗材料
1.材料
徐薯18葉片RNA樣品
2.試劑
�、� dNTP mixture（10 mM each）；
② Oligo (dT) Primer (10 μM)；
�、� Total RNA；
�、� RNase free ddH2O；
�、� M-MLV 反轉錄酶；
�、� 5×First-strand Buffer；
�、� 0.1 M DTT；
⑧ Ribonuclease Inhibitor (40 U/μL)
3.儀器
10μL 和100μL 的移液槍、0.5mL的EP管、PCR儀等
四、實驗方法
1.在RNase free Microtube 管中配制下列混合液：
dNTP mixture（10 mM each）1 μL
*Oligo (dT) Primer (10 μM) 4 μL
Total RNA2 μL
生物技術綜合實驗報告 2
�。ǖ谝徊糠郑�
實驗一 工作液的配制、培養(yǎng)基配制、器皿洗滌及滅菌
一、實驗目的
掌握各種工作液配制方法；了解植物培養(yǎng)基的構成及配制方法；掌握高溫高壓滅菌的方法。
二、原理
培養(yǎng)基是植物組織培養(yǎng)的基本條件，同時也是關鍵因素。
濕熱條件(121℃的蒸汽，10分鐘)能夠有效地殺滅附著在玻璃器皿、器具以及溶液和培養(yǎng)基中的微生物達到滅菌的目的。
三、器具和試劑
滅菌鍋，天平，電爐，微波爐，三角瓶，封口膜，移液管，移液器，量筒，燒杯，pH試紙，培養(yǎng)皿，濾紙，Parafilm封口膜。
瓊脂，MS培養(yǎng)基大量元素，無菌水，葡萄糖，2, 4-D，IBA，KT （激動素），1M NaOH及HCl，卡那霉素，頭孢霉素，乙酰丁香酮 。
四、 實驗內容
PH調節(jié)劑的配制、培養(yǎng)基母液的配制、培養(yǎng)基的配制、各種相關物品的準備
�。ㄒ唬┡囵B(yǎng)基的配制步驟
1、取個干凈燒杯，加入1/3-2/3左右的蒸餾水，用移液管取所需的母液加入燒杯。
2、稱取定量的蔗糖加入燒杯中并不斷攪拌，直到完全溶解，定容。
3、用NaOH或者 稀HCL調劑酸堿值。
4、稱取定量瓊脂糖加入燒杯中，加熱煮沸攪拌，待瓊脂完全溶解，分裝。
5、高壓滅菌（121℃,15min-20min)。
6、冷卻，取出，備用。
�。ǘ┟藁o菌苗培養(yǎng)基的制備
1、取25 ml MS大量元素母液，稱取葡萄糖15g、于1升的燒杯中，定容后調pH值為6.0，加入7.5g/l 瓊脂煮沸。
2、然后將其分裝到100毫升的三角瓶中，每瓶40毫升。
3、用封口膜封口后在滅菌鍋中滅菌15分鐘。
4、滅菌后臵于水平的工作臺上冷卻即可。
要求：配制 1L
�。ㄈ⿺M南芥無菌苗培養(yǎng)基的制備
1、擬南芥無菌苗培養(yǎng)基：1/2 MS大量元素+蔗糖10g/L，PH值6.0；加入7.5g瓊脂高溫高壓滅菌。
2、0.1%瓊脂糖：0.1g瓊脂糖/100ml 蒸餾水；無菌苗培養(yǎng)基和0.1%瓊脂糖均121°高壓滅菌15分鐘。
3、另準備20套9cm培養(yǎng)皿，滅菌。
要求：配制0.5L，裝1瓶滅菌，滅菌后培養(yǎng)基倒皿。
五、注意事項
1、為了盡量減少人為的誤差，必須嚴格按實驗步驟進行操作，嚴格按照要求的量來配制工作液、母液及培養(yǎng)基。
2、應當把培養(yǎng)基中的.各種成分都寫在紙上，加進去一個以后即劃掉一個。
3、所有裝著培養(yǎng)基的試管、玻璃罐、玻璃瓶和培養(yǎng)皿等都應當清楚地做上標記。
4、每小組的操作的具體事項請參照黑板上貼的任務分組。
5、愛護實驗儀器及耗材，小心使用玻璃器皿，合理滅菌，因為滅菌耗時較長。
實驗二 無菌苗的制備
一、原理
化學滅菌：0.1%升汞(Hgcl2)溶液浸泡10分鐘可以對棉花種子等外植體進行滅菌，84消毒液（2%的次氯酸鈉）浸泡3分鐘可以對擬南芥等小種子外植體進行消毒。 物理消毒：紫外燈消毒、酒精燈火焰或高溫燒灼5min左右可有效殺死鑷子、剪刀等不銹鋼操作器具的菌類達到消毒的目的。
二、實驗材料、器具和試劑
棉花品種YZ1;擬南芥col-0野生型 滅菌鍋，天平，電爐，三角瓶，封口膜，鑷子，酒精燈，剪刀，移液管，超凈工作臺。
0.1%升汞溶液，84消毒液，75%酒精
三、實驗內容
�。ㄒ唬⿺M南芥無菌苗培養(yǎng)基倒皿
1.取上次滅菌好的擬南芥培養(yǎng)基（500ml裝），稍微擰松瓶蓋，微波爐煮沸，邊煮邊搖動，至全部融化。
2.將上次滅菌好的9cm培養(yǎng)皿分開放臵超凈工作臺（超凈工作臺需先打開）上。
3.將融化好的培養(yǎng)基分裝于培養(yǎng)皿中（500ml/18-20皿），將皿至于超凈臺上吹干.。
�。ǘ┕才囵B(yǎng)培養(yǎng)基的配制
成分數量 成分 數量
MS大量元素 (20倍） 50 ml 2,4-D (0.1mg/ ml)1 ml
NH4NO3 (20倍) 50 ml 甘氨酸(1000倍)1 ml
微量元素 (100倍)10 ml KT(0.1mg/ml)1 ml
鐵鹽 (100倍) 10 ml 葡萄糖 30g/L
微生素(1000倍) 1 mlPH值5.85-5.90 肌醇 (100倍) 1 ml
依次加入上述物質，調PH值5.85-5.90，然后分裝至2個500ml藍蓋瓶，每瓶加入4g瓊脂，滅菌，滅菌后倒皿。
�。ㄈ┻x擇培養(yǎng)基的配制
共培養(yǎng)培養(yǎng)基 +卡那霉素50mg/L + 頭孢霉素400 mg/L
滅菌后，待培養(yǎng)基涼至60度左右加入，混勻，倒皿。
�。ㄋ模┟藁o菌苗的制備
1、將棉籽用手術剪刀去殼（每人3顆，飽滿無病蟲害種子）。
2、用0.1%的升汞滅菌13分鐘。
3、無菌水沖洗三遍，接種于無菌苗培養(yǎng)基中。
4、28℃條件下暗培養(yǎng)7天 （304培養(yǎng)箱）。
�。ㄎ澹⿺M南芥無菌苗的制備
大量法滅菌：將擬南芥種子放入1.5ml離心管中，加入84消毒液：無菌水=1:1的混合液1ml，上下?lián)u晃滅菌2min，棄消毒液；加入1ml 75%的酒精混勻1min，然后無菌水清洗4次；加入0.1%瓊脂糖溶液懸浮種子，用移液槍涂布于擬南芥無菌苗培養(yǎng)基，
吹干，封口。弱光培養(yǎng)兩天至種子萌發(fā)，轉至光照培養(yǎng)室培養(yǎng)兩周（304培養(yǎng)箱）。
五、注意事項
所有操作（除數種子）均在超凈工作臺上進行。
六、實驗結果
一周后觀察無菌苗的生長狀況
1、六瓶接種的棉花無菌苗中有一瓶被輕度污染，其余五瓶生長狀況良好。
2、擬南芥的無菌苗因涂布不均勻長勢一般，幼苗較其他小組要弱小，葉片顏色較深。
實驗三 愈傷組織的誘導及農桿菌介導的棉花遺傳轉化
一、實驗目的
掌握植物體細胞胚胎發(fā)生的基本理論；了解植物愈傷組織在誘導和分化過程中的形態(tài)學、細胞學特征；進一步鞏固植物離體培養(yǎng)和無菌操作的步驟；掌握植物遺傳轉化的方法、理論；掌握根癌農桿菌介導的植物遺傳轉化技術。
二、實驗原理
植物細胞全能性：植物的每個細胞都包含著該物種的全部遺傳信息，從而具備發(fā)育成完整植株的遺傳能力。
愈傷組織：
胚性愈傷：呈淡黃色或者黃綠色，質地較均勻；細胞球狀或近球狀，細胞核大，細胞質濃
非胚性愈傷：呈褐色、白色粉末狀或白色、綠色堅硬塊狀 ；細胞一般為長柱狀等非規(guī)則形狀，細胞核小，細胞質較稀 。
農桿菌介導轉基因的原理：植物細胞在受傷后，創(chuàng)傷分子誘導農桿菌Vir區(qū)各種基因的激活和表達，導致T-DNA被剪切，加工，形成T-鏈蛋白復合體（T-復合體），通過農桿菌和植物細胞的細胞膜，細胞壁進入植胞內，T-復合體上的核靶向序列可引導T-DNA整合到植物基因組。
三、材料與用品
1、實驗材料：棉花材料YZ1（上周做的無菌苗）、農桿菌菌株LBA4404。
2、用具： 超凈工作臺， 顯微鏡，載玻片，天平，三角瓶，封口膜，橡皮筋，鑷子，酒精燈，培養(yǎng)皿，濾紙，剪刀，醫(yī)用手術刀，搖床。
3、藥品：誘導、共培養(yǎng)培養(yǎng)基，卡寶品紅染色液，MGL活化培養(yǎng)基，LB培養(yǎng)基，乙酰丁香酮（AS）。
四、實驗步驟
（一）棉花愈傷組織的誘導及觀察
1、愈傷誘導培養(yǎng)基的配制（第1周已做）
2、無菌苗的制備
3、無菌苗的切�。哼x取培養(yǎng)7天左右健壯的無菌苗臵于墊有濾紙的培養(yǎng)皿上，用解剖刀切掉子葉及生長點，切掉胚根及相連的約1/4的下胚軸，余下的下胚軸用作愈傷組織誘導的外植體，用解剖刀將下胚軸切成～0.7cm小段。
4、外植體接種及離體培養(yǎng)：將切離好的外植體接種于愈傷誘導培養(yǎng)基上（每瓶約7段），平行放臵，28℃光照培養(yǎng)，每天14小時光照，進行愈傷組織誘導及增殖培養(yǎng)。
5、愈傷組織繼代（一個月后）：待培養(yǎng)一個月左右，將增殖后的愈傷組織連同下胚軸切斷繼代到分化培養(yǎng)基上，進行胚性愈傷組織的分化。
6、愈傷組織形態(tài)觀察：分別挑取少量非胚性愈傷和胚性愈傷組織，臵于載玻片上，滴幾滴清水用鑷子搗碎愈傷組織，然后滴加一滴卡寶品紅染色數秒鐘后，在顯微鏡下觀察比較兩者細胞學特征。
�。ǘ┺r桿菌介導的棉花下胚軸的遺傳轉化
1、共培養(yǎng)及選擇培培養(yǎng)基的配制（第2周已做，沒倒皿的組倒皿）
2、無菌苗的制備（第2周已做）
3、農桿菌的活化（研究生幫忙做）：從超低溫冰箱內取出保存菌株的甘油管在冰上融化；按1:100的體積加入20ml LB液體培養(yǎng)基里搖菌，28℃暗培養(yǎng)36-48hr；將渾濁的農桿菌液涂布于LB平皿上，28℃暗培養(yǎng)36-48hr；把培養(yǎng)基表面菌落刮入裝有20ml MGL培養(yǎng)基的三角瓶中（按1/1000比例加入AS），28℃、200rpm搖30min；OD值在0.5-1.5之間（估計）即可用于侵染。
4、下胚軸與農桿菌共培養(yǎng)：把無菌苗切成~7mm莖段（同誘導程序），用鑷子夾到經活化的菌液中進行侵染，搖勻，侵染10分鐘；倒掉菌液，將下胚軸轉入裝有濾紙的滅菌培養(yǎng)皿中，吹5分鐘使表面稍為干燥；再將下胚軸分散布于墊有濾紙的共培養(yǎng)培養(yǎng)基中，19-21℃, 暗培養(yǎng)48-60小時結束共培養(yǎng)。
5、選擇培養(yǎng)（48-60小時后）：把經過共培養(yǎng)的下胚軸用鑷子轉入選擇培養(yǎng)基中，培養(yǎng)30天左右繼代一次轉入相同的選擇培養(yǎng)基中。
五、注意事項
1、在切無菌苗時，一定要使用鋒利的刀片,盡量做到一刀能切斷，避免擠壓莖段。
2、無菌苗培養(yǎng)時間不宜過長（培養(yǎng)七天最好）。
3、從超低溫冰箱內取出的甘油管，應盡量減少其在冰箱外的時間，用完后盡快放回冰箱。
4、侵染時下胚軸稍為干燥可以增加農桿菌的吸附。
5、共培養(yǎng)后第一次進行選擇培養(yǎng)時應盡量使培養(yǎng)的環(huán)境保持干燥，可以減少農桿菌的污染。
6、整個過程均為無菌操作環(huán)境。
六、實驗結果：
1.錐形瓶與平皿中的下胚軸生長狀況均良好，觀察到平皿中農桿菌介導轉化的下胚軸有發(fā)黑的現象，而錐形瓶中誘導的愈傷組織則無發(fā)黑現象。
2.兩個平皿中的擬南芥均生長緩慢且幼葉發(fā)黃，推測原因可能與雜菌感染有關。
生物技術綜合實驗報告 3
一、實驗名稱
用高倍顯微鏡觀察葉綠體和細胞質流動
二、實驗目的
1、初步掌握高倍顯微鏡的使用方法。
2、觀察高等植物的葉綠體在細胞質基質中的形態(tài)和分布
三、實驗原理
高等植物的葉綠體呈橢球狀，在不同的光照條件下，葉綠體可以運動，改變橢球體的方向，這樣既能接受較多的光照，又不至于被強光灼傷。在強光下，葉綠體以其橢球體的側面朝向光源；在弱光下，葉綠體以其橢球體的正面朝向光源。因此，在不同光照條件下采集的`葫蘆蘚，其小葉內葉綠體橢球體的形狀不完全一樣。活細胞中的細胞質處于不斷的流動狀態(tài)，觀察細胞質的流動，可以用細胞質基質中的葉綠體的運動做為標志。
四、材料用具
蘚類的葉，新鮮的黑藻，顯微鏡，載玻片，蓋玻片，滴管，鑷子，刀片，培養(yǎng)皿，鉛筆
五、實驗過程（見書p30）
1、制作蘚類葉片的臨時裝片
2、用顯微鏡觀察葉綠體
3、制作黑藻葉片臨時裝片
4、用顯微鏡觀察細胞質流動
六、討論
1、細胞質基質中的葉綠體是否靜止不動，為什么？
2、葉綠體的形態(tài)和分布與葉綠體的功能有什么關系？
3、植物細胞的細胞質處于不斷的流動狀態(tài)，這對于活細胞完成生命活動有什么意義？
4、用鉛筆畫一個葉片細胞，標出葉綠體的大致流動方向。
生物技術綜合實驗報告 4
一、實驗目的
1. 初步學會觀察植物細胞質壁分離和復原的方法。
2. 理解植物細胞發(fā)生滲透作用的原理。
二、實驗原理
當細胞液的濃度小于外界溶液的濃度時，細胞液中的水分就透過原生質層進入外界溶液中，使細胞壁和原生質層都出現一定的收縮。由于原生質層比細胞壁的收縮性大，當細胞不斷失水時，原生質層就會與細胞壁逐漸分離開，也就是分升了質壁分離當細胞液的濃度大于外界溶液的濃度時，外界溶液中的水分就透過原生質層進入細胞液中，整個原生質層就會慢慢地恢復成原來的狀態(tài)，使植物細胞逐漸發(fā)生質壁分離復原。
三、材料用具
紫色洋蔥鱗片葉、顯微鏡、載玻片、蓋玻片、滴管、鑷子、刀片、吸水紙、清水、0.3g/ml蔗糖溶液
四、實驗過程(見書P60)
物理實驗報告 ——化學實驗報告 ——生物實驗報告 ——實驗報告格式 ——實驗報告模板
五、討論
1.如果將洋蔥表皮細胞浸潤在與細胞液濃度相同的`蔗糖溶液中，這些表皮細胞會出現什么現象?
2.當紅細胞細胞膜兩側的溶液具有濃度差時，紅細胞會不會發(fā)生質壁分離現象?為什么?
3.畫一個細胞在正常狀態(tài)下到經過0.3g/ml蔗糖溶液處理，再經過清水處理的細胞變化的一系列模式圖。
生物技術綜合實驗報告 5
實驗教師：xxx
所在學校：xxx中學
目的要求：
1練習徒手切片
2認識葉片的結構
3畫葉片的表皮細胞和保衛(wèi)細胞
材料用具：
新鮮葉片（如菠菜、槐樹、蠶豆的葉片），顯微鏡，雙面刀片（兩片、并在一起、一側用膠布粘牢）、鑷子、載玻片、蓋玻片、葉片的永久切片、盛有清水的培養(yǎng)皿、滴管、吸水紙、碘液、紗布、毛筆、小木板。
方法步驟
方法與步驟要點
注意事項
�。ㄒ唬┚毩曂绞智衅�，制作葉片橫切片的臨時切片
1將新鮮的葉片平放在小木板上。
2右手捏緊并排的兩片刀片，沿著圖中虛線的方向，迅速切割。
3把刀片夾縫中存在的切下的薄片放入盛有清水培養(yǎng)皿中。要多切幾次（每切一次，刀片要蘸一下水）。
4用毛筆蘸出最薄的一片，制成臨時切片。葉片下面要墊上小塊木板，以防損壞桌面。刀片要捏緊，切割速度要快，注意安全。
為了便于觀察，載玻片的水滴中可以同時放幾片葉的橫切片，選擇切得最薄的一片用來觀察。
（二）觀察葉片的結構
1.用顯微鏡先觀察葉片橫切面的臨時切片，再觀察葉片的永久橫切片。
2.觀察時注意分清時的表皮、葉肉和葉脈。
仔細觀察上、下表皮細胞的區(qū)別
�。ㄈ┯^察葉片的'下表皮
1.用鑷子撕下一小塊葉片的下表皮，制成臨時裝片。
2.用顯微鏡進行觀察，下表皮細胞的形態(tài)是什么樣子的，下表皮上有沒有氣孔？
撕取下表皮時，一定要薄，否則影響觀察效果。
注意觀察氣孔的結構。
（四）畫圖
在下面空白處畫出下表皮上一對保衛(wèi)細胞及周圍的幾個表皮細胞，這一對保衛(wèi)細胞要詳細畫，周圍的細胞只需勾出輪廓。
畫圖時，要真實、實事求是。
討論與交流
1.保衛(wèi)細胞的結構特點對植物的蒸騰作用有什么意義？
2.從結構上看，葉片有哪些方面是適于接受陽光的？
生物技術綜合實驗報告 6
一、實驗目的：
1、掌握顯示細胞中過氧化物酶反應的原理和方法。2.了解細胞凋亡的生物學意義
3、掌握凋亡細胞的形態(tài)學檢測方法
二、實驗原理：
1、細胞內的過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物，用聯(lián)苯胺處理標本，細胞內的過氧化物酶能把聯(lián)苯胺氧化為藍色的聯(lián)苯胺藍，進而變?yōu)樽厣a物，因而可以根據顏色反應來判定過氧化物酶的'有無或多少。中間產物藍色聯(lián)苯胺是不穩(wěn)定的，無需酶的參加即可氧化為棕色化合物。
2、細胞凋亡是指細胞在生理或病理條件下，遵循自身的程序，自己結束其生命的過程。它是一個主動的、高度有序的，基因控制的，一系列酶參與的過程。
3、凋亡細胞形態(tài)學特征是:體積變小,細胞質濃縮;細胞核發(fā)生染色質凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體;根據細胞凋亡形態(tài)學特征進行顯微觀察是檢測細胞凋亡的一種直觀、可靠的方法。
三、實驗步驟：
細胞中過氧化物酶的顯示
1、在載片上滴一滴PBS緩沖液；
2、取骨髓細胞：用斷頸法處死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剝出后肢股骨，剪開股骨一端，用牙簽尖的一端插入剪開的小孔中，摳取少許骨髓細胞置滴有PBS的載片上；
3、涂片：用另一玻片將骨髓細胞沿一個方向涂布推開，室溫晾干；
4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸銅液，以蓋滿涂片為宜，處理30秒-1分鐘。5、傾去硫酸銅液，直接滴入聯(lián)苯胺混合液反應6分鐘（以蓋滿涂片為宜）6、清水沖洗，番紅復染2min。
7、鏡檢：清水沖洗，室溫晾干，先低倍鏡下觀察，后換高倍鏡下觀察（油鏡100×）
細胞凋亡的形態(tài)學檢測與觀察吉姆薩染色:
1、取細胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞3、95%乙醇固定5min
4、PBS緩沖液洗2次
5、吉姆薩染色液染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
7、普通光學顯微鏡下觀察。吖啶橙染色:
1、取細胞爬片置于小培養(yǎng)皿中(有細胞面朝上)2、生理鹽水輕輕漂洗細胞
3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS緩沖液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光環(huán)境下染色5min6、蒸餾水輕輕洗去染液
6、選用藍光激發(fā)濾片在熒光顯微鏡下觀察。
四、結果與分析：
1、根據隨機選擇的幾個視野的統(tǒng)計，該樣品的細胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela細胞凋亡過程中核染色質的形態(tài)變化（吖啶橙染色）
五、思考題：
1、細胞凋亡的調控機制
細胞凋亡是一個受基因調控、眾多細胞膜受體和胞漿蛋白參與的細胞主動自殺過程，其觸發(fā)因素多種多樣，包括細胞內誘導因子和抑制因子對細胞凋亡的調控。
2、細胞凋亡的特征
凋亡細胞形態(tài)學特征是:體積變小,細胞質濃縮;細胞核發(fā)生染色質凝聚和聚集于核膜周圍(邊緣化);細胞膜有小泡狀形成;晚期細胞膜內陷形成大小不同的凋亡小體。
3、研究細胞凋亡的方法
定性的研究方法：常規(guī)瓊脂糖凝膠電泳、脈沖場倒轉瓊脂糖凝膠電泳、形態(tài)學觀察（普通光學顯微鏡、透射電鏡、熒光顯微鏡）
定量或半定量的研究方法：各種流式細胞儀方法、原位末端標記法、ELISA定量瓊脂糖凝膠電泳。
生物技術綜合實驗報告 7
一、實驗目的：
1、通過對原核和真核各種形態(tài)細胞的光學顯微鏡觀察，了解細胞的形態(tài)及其顯微結構；
2、學習顯微測量的方法，對細胞的大小有一直觀認識。
二、實驗材料和儀器：
小白鼠肝細胞切片；雞血紅細胞；蠶豆葉片橫切片；
普通光學顯微鏡；目鏡測微尺；鏡臺測微尺；載玻片；蓋玻片。
三、實驗步驟：
(一)細胞形態(tài)觀察
l、動物細胞的觀察
（1）人肝細胞切片：在顯微鏡下仔細觀察肝細胞的形態(tài)構造。
（2）雞血細胞涂片的觀察：觀察血細胞的組成；紅細胞、白細胞、血小板的形態(tài)特點。
2、植物細胞的觀察
取蠶豆葉片橫切片的觀察：注意表皮細胞和葉肉細胞的基本結構。
（二）細胞的大小和測量
1、卸下目鏡的上透鏡，將目鏡測微尺刻度向下裝在目鏡的'焦平面上，再旋上目鏡的上透鏡。
2、將鏡臺測微尺刻度向上放在鏡臺上夾好，使測微尺分度位于視野中央。調焦至能看清鏡臺測微尺的分度。
3、小心移動鏡臺測微尺和轉動目鏡測微尺(如目鏡測微尺分度模糊，可轉動目鏡上透鏡進行調焦)，使兩尺左邊的一直線重合，然后由左向右找出兩尺另一次重合的直線。
4、記錄兩條重合線間目鏡測微尺和鏡臺測微尺的格數。按下式計算目鏡測微尺每格等于多少μm：
鏡臺測微尺的格數
目鏡測微尺每格的微米數=————————— × 10
目鏡測微尺的格數
四、實驗結果：
1、目鏡校正：40倍顯微鏡目鏡測微尺每格的微米數=17/70=0.24
2、細胞大小的測量：
五、作業(yè)與思考：
1、血細胞按含量高低，主要含有：紅細胞，白細胞，血小板。
白細胞最大，紅細胞次之，血小板最小。紅細胞：主要的功能是運送氧。 白細胞：主要扮演了免疫的角色，當病菌侵入人體時，白細胞能穿過毛細血管壁，集中到病菌入侵部位，將病菌包圍，吞噬。血小板：止血過程中起著重要作用。細胞形態(tài)見下圖。
2、植物細胞一般比動物細胞大一些。形態(tài)圖見下。
3、在不同放大倍數下，測定的細胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍數越大，在視野中同等實際距離下的兩點視野距離更大，而更容易測量準確。
生物技術綜合實驗報告 8
一、實驗目的
1.初步學會探索酶催化特定化學反應的方法。
2.探索淀粉酶是否只能催化特定的化學反應。
二、實驗原理
淀粉和蔗糖都是非還原糖，它們在酶的催化作用下都能水解成還原糖，還原糖能夠與斐林試劑發(fā)生氧化還原反應，生成磚紅色的`氧化亞銅沉淀。
用淀粉酶分別催化淀粉溶液和蔗糖溶液，再用斐林試劑鑒定溶液中有無還原糖，就可以看出淀粉酶是否能催化這兩種化學反應。
三、材料用具
滴管、試管、火柴、試管架、溫度計、三腳架、石棉網、酒精燈、燒杯、質量分數為2%的新鮮淀粉酶溶液、質量分數為3%的可溶性淀粉溶液、質量分數為3%的蔗糖溶液、斐林試劑
四、實驗過程
（見書Ｐ47）
五、討論
1.制備的可溶性淀粉溶液,必須完全冷卻后才能使用。為什么？
�。�.兩支試管保溫時,為什么要控制在60℃左右(低于50℃或高于75℃)?
3.如果2號試管也產生了磚紅色沉淀,可能是由哪些原因造成的？
生物技術綜合實驗報告 9
一、實驗目的：
1、學會如何使用顯微鏡觀察細胞；
2、了解細胞的結構；
3、學會制作臨時裝片。
二、實驗材料：（實驗材料可換）松針、動物血液、動物神經細胞永久裝片
三、實驗用具： 載玻片、蓋玻片、蒸餾水、滴管、鑷子、土豆、刀片、顯微鏡（物鏡5X、10X、40X）
四、方法步驟：
1、制作松針的臨時切片：
�。�1）取干凈的載玻片一個平置于試驗臺上，用滴管在載玻片中央滴一滴蒸餾水。
�。�2）將土豆切成條狀（截面約：0.5X0.5cm)取兩條，將一根松針夾在兩個土豆條之間，用刀片削成盡量薄的薄片，削時，手腕不動，靠大臂帶動小臂移動刀片。切片數次。從中選取較薄的切片，置于載玻片的水滴上。
�。�3）從一側輕輕蓋上蓋玻片，不要產生氣泡。用吸水紙輕輕吸去蓋玻片周圍的水滴，即完成臨時切片的制作。
2、觀察切片：
�。�1）取出顯微鏡，置于試驗臺上靠左的位置，打開光源。
（2) 將上步制作好的切片置于顯微鏡的`載物臺上，調整載物臺位置，使蓋玻片對準光源。
（3）使用5X物鏡觀察切片，使松針切片在視野中心，換成10X物鏡，觀察松針葉面橫切結構。
�。�4）換成40X物鏡觀察，注意細胞及細胞內物質結構，畫圖。
3、動物血液臨時裝片的制作及觀察（除了不用切片，其他類似）
4、 動物神經細胞永久裝片的觀察。
五、反思：
1、松針的葉面結構是什么樣的？
2、動物細胞的結構是什么樣的？與植物細胞又什么不同？
3、顯微鏡的物鏡倍數愈大，視野的亮度如何？物體的大小如何？
4、如何調節(jié)焦距？
5、如何才能使切片盡量的薄？切片的厚薄對顯微鏡下觀察的效果有什么影響。
生物技術綜合實驗報告 10
一、 實驗室規(guī)則
1.實驗前應認真預習實驗指導，明確實驗目的和要求，寫出預實驗報告。
2.進入實驗室必須穿白大衣。嚴格遵守實驗課紀律，不得無故遲到或早退。不得高聲說話。嚴禁拿實驗器具開玩笑。實驗室內禁止吸煙、用餐。
3.嚴格按操作規(guī)程進行實驗。實驗過程中自己不能解決或決定的問題，切勿盲目處理，應及時請教指導老師。
4.嚴格按操作規(guī)程使用儀器，凡不熟悉操作方法的儀器不得隨意動用，對貴重的精密儀器必須先熟知使用方法，才能開始使用；儀器發(fā)生故障，應立即關閉電源并報告老師，不得擅自拆修。
5.取用試劑時必須“隨開隨蓋”，“蓋隨瓶走”，即用畢立即蓋好放回原處，切忌“張冠李戴”，避免污染。
6.愛護公物，節(jié)約水、電、試劑，遵守損壞儀器報告、登記、賠償制度。
7.注意水、電、試劑的使用安全。使用易燃易爆物品時應遠離火源。用試管加熱時，管口不準對人。嚴防強酸強堿及有毒物質吸入口內或濺到別人身上。任何時候不得將強酸、強堿、高溫、有毒物質拋灑在實驗臺上。
8.廢紙及其它固體廢物嚴禁倒入水槽，應倒到垃圾桶內。廢棄液體如為強酸強堿，必須事先用水稀釋，方可倒入水槽內，并放水沖走。
9.以實事求是的科學態(tài)度如實記錄實驗結果，仔細分析，做出客觀結論。
實驗失敗，須認真查找原因，而不能任意涂改實驗結果。實驗完畢，認真書寫實驗報告，按時上交。
10.實驗完畢，個人應將試劑、儀器器材擺放整齊，用過的玻璃器皿應刷洗干凈歸置好，方可離開實驗室。值日生則要認真負責整個實驗室的清潔和整理，保持實驗整潔衛(wèi)生。離開實驗室前檢查電源、水源和門窗的安全等，并嚴格執(zhí)行值日生登記制度。
二、實驗報告的基本要求
實驗報告通過分析總結實驗的結果和問題，加深對有關理論和技術的理解與掌握，提高分析、綜合、概括問題的能力，同時也是學習撰寫研究論文的過程。
1.實驗報告應該在專用的生化實驗報告本上、按上述格式要求書寫。
2.實驗報告的前三部分
�、賹嶒炘�
②實驗材料（包括實驗樣品、主要試劑、主要儀器與器材）
③實驗步驟（包括實驗流程與操作步驟）要求在實驗課前預習后撰寫，作為實驗預習報告的內容。預習時也要考慮并設計好相應實驗記錄的表格。
3.每項內容的基本要求
（1）實驗原理：簡明扼要地寫出實驗的原理，涉及化學反應時用化學反應方程式表示。
（2）實驗材料：應包括各種來源的生物樣品及試劑和主要儀器。說明化學試劑時要避免使用未被普遍接受的商品名和俗名。試劑要標清所用的濃度。
�。�3）實驗步驟：描述要簡潔，不能照抄實驗講義，可以采用工藝流程圖的方式或自行設計的表格來表示，但對實驗條件和操作的'關鍵環(huán)節(jié)應寫清楚，以便他人重復。
（4）實驗記錄：包括主要實驗條件、實驗中觀察到的現象及實驗中的原始數據。
�。�5）結果（定量實驗包括計算）：應把所得的實驗結果（如觀察現象）和數據進行整理、歸納、分析、對比，盡量用圖表的形式概括實驗的結果，如實驗組與對照組實驗結果的比較表等(有時對實驗結果還可附以必要的說明)。
�。�6）討論：不應是實驗結果的重述，而是以結果為基礎的邏輯推論。如對定性實驗，在分析實驗結果的基礎上應有中肯的結論。還可以包括關于實驗方法、操作技術和有關實驗的一些問題，對實驗異常結果的分析和評論，對于實驗設計的認識、體會和建議，對實驗課的改進意見等。
�。�7）結論：一般實驗要有結論，結論要簡單扼要，說明本次實驗所獲得的結果。
三、實驗報告的評分標準（百分制）
1.實驗預習報告內容（30分）
學生進入實驗室前應預習實驗，并書寫預習報告。實驗預習報告應包括以下三部分：
�、賹嶒炘恚�10分）：要求以自己的語言歸納要點；
�、趯嶒灢牧希�5分）：包括樣品、試劑及儀器。只列出主要儀器、試劑（常規(guī)材料不列）；
�、蹖嶒灧椒ǎ�15分）：包括流程或路線、操作步驟，要以流程圖、表格式給出要點，簡明扼要。依據各部分內容是否完整、清楚、簡明等，分以下三個等級給分。
優(yōu)秀：項目完整，能反映實驗者的加工、整理、提煉。
合格：較完整，有一定整理，但不夠精煉。
不合格：不完整、缺項，大段文字，完全照抄教材，記流水賬。
實驗預習報告不合格者，不允許進行實驗。該實驗應重新預約，待實驗室安排時間后方可進行實驗。
2.實驗記錄內容（20分）
實驗記錄是實驗教學、科學研究的重要環(huán)節(jié)之一，必須培養(yǎng)嚴謹的科學作風。
實驗記錄的主要內容包括以下三方面：
�、僦饕獙嶒灄l件（如材料的來源、質量；試劑的規(guī)格、用量、濃度；實驗時間、操作要點中的技巧、失誤等，以便總結實驗時進行核對和作為查找成敗原因的參考依據）；
�、趯嶒炛杏^察到的現象（如加入試劑后溶液顏色的變化）；
③原始實驗數據：設計實驗數據表格（注意三線表格式），準確記錄實驗中測得的原始數據。記錄測量值時，要根據儀器的精確度準確記錄有效數字（如吸光值為0.050，不應寫成0.05），注意有效數字的位數。
實驗記錄應在實驗過程中書寫；應該用鋼筆或者圓珠筆記錄，不能用鉛筆。記錄不可擦抹和涂改，寫錯時可以準確劃去重記。記錄數據時請教師審核并簽名。
實驗記錄分以下三個等級給分。
優(yōu)秀：如實詳細地記錄了實驗條件、實驗中觀察到的現象、結果及實驗中的原始數據（如三次測定的吸光度值）等；實驗記錄用鋼筆或者圓珠筆記錄，沒有抹擦和涂改跡象。書寫準確，表格規(guī)范（三線表）。有教師的簽字審核。
合格：記錄了主要實驗條件，但不詳細、凌亂；實驗中觀察到的現象不細致；原始數據無涂改跡象，但不規(guī)范。有教師的簽字審核。
不合格：記錄不完整，有遺漏；原始數據有抹擦和涂改跡象、捏造數據（以0分計）；圖、表格形式錯誤；用鉛筆記錄原始數據；無教師的簽字審核。 若記錄的結果有懷疑、遺漏、丟失，必須重做實驗，培養(yǎng)嚴謹的科學作風。
3.結果與討論（45分）
�。�1）數據處理（5分）
對實驗中所測得的一系列數值，要選擇合適的處理方法進行整理和分析。數據處理時，要根據計算公式正確書寫中間計算過程或推導過程及結果，得出最終實驗結果。要注意有效數字的位數、單位（國際單位制）。經過統(tǒng)計處理的數據要以X〒SD表示。可分成以下三個等級給分。
優(yōu)秀：處理方法合理，中間過程清楚，數據格式單位規(guī)范。
合格：處理方法較合理，有中間計算過程；數據格式單位較規(guī)范。
不合格：處理方法不當；無中間過程；有效數字的位數、單位不規(guī)范。
�。�2）結果（20分）
實驗結果部分應把所觀察到的現象和處理的最終數據進行歸納、分析、比對，以列表法或作圖法來表示。同時對結果還可附以必要的說明。
要注意圖表的規(guī)范：表格要有編號、標題；表格中數據要有單位（通常列在每一列頂端的第一行或每一行左端的第一列）。圖也要有編號、標題，標注在圖的下方；直角坐標圖的縱軸和橫軸要標出方向、名稱、單位和長度單位；電泳圖譜和層析圖譜等要標明正、負極方向及分離出的區(qū)帶、色帶或色斑的組分或成分。電泳結果還要標記泳道，并在圖題下給出泳道的注釋；要標出分子量標準的各條帶的大小。并且注意需要結合圖表對結果進行較詳細的解釋說明。
可分成以下三個等級給分。
優(yōu)秀：實驗結果有歸納、 解釋說明，結果準確，格式規(guī)范。
合格：堆砌實驗現象、數據，解釋說明少。
不合格：最終實驗結果錯誤且無解釋說明，圖表、數字不規(guī)范。
（3）討論（20分）
討論應圍繞實驗結果進行，不是實驗結果的重述，而是以實驗結果為基礎的邏輯推論，基本內容包括：①用已有的專業(yè)知識理論對實驗結果進行討論，從理論上對實驗結果的各種資料、數據、現象等進行綜合分析、解釋，說明實驗結果，重點闡述實驗中出現的一般規(guī)律與特殊性規(guī)律之間的關系。
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