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生物化學(xué)綜合實(shí)驗(yàn)合肥工業(yè)大學(xué)精品課程
一、實(shí)驗(yàn)題目
1.核酸的分離純化及性質(zhì)研究
2.蛋白質(zhì)的分離純化及性質(zhì)研究
3.糖蛋白的分離純化及性質(zhì)研究
4.脂的分離純化及性質(zhì)研究
二、選題要求
1.每小組（2個(gè)人組成一個(gè)小組）選一個(gè)實(shí)驗(yàn)題目；
2.實(shí)驗(yàn)中所需生物材料自選，可選用多種生物材料；
3.實(shí)驗(yàn)內(nèi)容的安排要有一定工作量，必須包括指導(dǎo)書中要求運(yùn)用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。
三、學(xué)生準(zhǔn)備的要求
學(xué)生選定實(shí)驗(yàn)內(nèi)容后，要寫出實(shí)驗(yàn)方案，包括：實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵饬x；實(shí)驗(yàn)方法及操作過程（至少準(zhǔn)備兩種方案）；各種方法所需儀器（包括設(shè)備和玻璃器皿）、藥品及其數(shù)量。實(shí)驗(yàn)方案必須在綜合實(shí)驗(yàn)前五周完成，并經(jīng)過指導(dǎo)教師審閱。
四、綜合實(shí)驗(yàn)的評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)
學(xué)生綜合實(shí)驗(yàn)成績(jī)由指導(dǎo)教師評(píng)定，分為優(yōu)秀、良好、中等、及格和不及格幾類。評(píng)定依據(jù)是學(xué)生的態(tài)度、出勤率、實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備情況、實(shí)驗(yàn)動(dòng)手能力、實(shí)驗(yàn)結(jié)果、以及實(shí)驗(yàn)的創(chuàng)新性上進(jìn)行評(píng)分（具體見附錄1）。
五、實(shí)驗(yàn)報(bào)告要求
綜合實(shí)驗(yàn)完成后，必須提供一份實(shí)驗(yàn)記錄和一份實(shí)驗(yàn)報(bào)告。實(shí)驗(yàn)報(bào)告形式見附錄2。
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
核酸的分離純化是核酸制備及分析的前提和基礎(chǔ)，通過本實(shí)驗(yàn)將學(xué)會(huì)和掌握核酸制備的一些基本操作和方法，通過分光光度法和電泳等實(shí)驗(yàn)技術(shù)研究核酸的性質(zhì)，同時(shí)掌握用RFLP技術(shù)分析不同材料之間親緣關(guān)系的方法。
實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
主要儀器：研缽、高速離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、渦旋儀、水浴鍋、微量加樣器、電泳儀、紫外透射反射
分析儀、PCR儀、試管、燒杯、試劑瓶、冰箱。
主要試劑：液氮、SDS、CTAB、Tris、乙醇、巰基乙醇、EDTA、氯仿、異丙醇、HCl、蔗糖、NaCl、苯、
PCR試劑盒等。
要求運(yùn)用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)
紫外分光光度技術(shù)、瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)、高速離心技術(shù)、限制性內(nèi)切酶酶解技術(shù)、PCR技術(shù)等。
參考書目（僅供參考，另外可以查閱期刊雜志）
1.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，武漢大學(xué)出版
2.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，中國(guó)科學(xué)技術(shù)大學(xué)出版社
3.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)原理和方法，北京大學(xué)出版社
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
蛋白質(zhì)（包括酶）的性質(zhì)、結(jié)構(gòu)和功能的研究，以及生物體內(nèi)物質(zhì)代謝途徑的闡明等都是建立在蛋白質(zhì)和酶的分離純化基礎(chǔ)上的。在蛋白質(zhì)的分離過程中，必須通過濃度、純度和活性的測(cè)定來決定分離步驟的取舍。酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)，尤其是抑制劑酶促反應(yīng)動(dòng)力學(xué)是研究酶的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的一個(gè)重要方面。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)蛋白質(zhì)（或酶）的分離純化、濃度、純度和活性的測(cè)定、動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究，從而掌握蛋白質(zhì)和酶的系列研究方法和操作。
實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
主要儀器：研缽、紗布、離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)、試管、燒杯、試劑瓶、冰箱、真空泵、透析、層析柱、
自動(dòng)收集器、漏斗等。
主要試劑：pH試紙、乙酸、硫酸、NaOH、HCl、硼酸、Tris、硫酸銨、胰蛋白酶等
要求運(yùn)用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)
鹽析技術(shù)、離心技術(shù)、柱層析技術(shù)、紫外分光光度技術(shù)、聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)、透析技術(shù)等。
參考書目（僅供參考，另外可以查閱期刊雜志）
1.蛋白質(zhì)技術(shù)手冊(cè)，科學(xué)出版社
2.現(xiàn)代酶學(xué)，華東理工大學(xué)出版社
3.蛋白質(zhì)電泳實(shí)驗(yàn)技術(shù)，科學(xué)出版社
實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
糖蛋白在功能性食品功效中有著重要作用，研究糖蛋白的性質(zhì)、功能都是建立在糖蛋白質(zhì)分離純化基礎(chǔ)上的。在糖蛋白質(zhì)的分離過程中，必須掌握分級(jí)柱層析技術(shù)，進(jìn)一步理解生物化學(xué)中有關(guān)成分分離提純的基本理論。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)糖蛋白質(zhì)進(jìn)行分離純化、相對(duì)分子質(zhì)量測(cè)定、簡(jiǎn)單理化性質(zhì)測(cè)定等，從而掌握和理解糖蛋白研究方法和操作。
實(shí)驗(yàn)儀器與試劑
主要儀器：研缽、紗布、離心機(jī)、層析柱、微量加樣器、水浴鍋、可見與紫外分光光度計(jì)、試管、燒杯、
試劑瓶、冰箱、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等。
主要試劑：苯酚、硫酸、雙縮脲試劑、Folin-酚試劑、HCl、Tris、NaOH、乙醇、丙酮、乙醚、牛血清、硫
酸、葡萄糖、DEAE-52纖維素、SephadexG-100、透析袋等
要求運(yùn)用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)
柱層析技術(shù)、透析技術(shù)、離心技術(shù)、分光光度技術(shù)等。
參考書目（僅供參考，另外可以查閱期刊雜志）
1.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)，武漢大學(xué)出版
2.生物化學(xué)技術(shù)原理及其應(yīng)用（第二版），武漢大學(xué)出版社
3.生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)方法和技術(shù)，科學(xué)出版社
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