腋區(qū)解剖實驗報告

　　在現(xiàn)實生活中，報告與我們的生活緊密相連，報告具有成文事后性的特點。那么大家知道標準正式的報告格式嗎？以下是小編收集整理的腋區(qū)解剖實驗報告，僅供參考，歡迎大家閱讀。

　　蛙類坐骨神經(jīng)–腓腸肌標本制備、不同頻率刺激對肌肉收縮的影響

　　一、目的要求

　　1、掌握蛙類雙毀髓的試驗方法；

　　2、掌握坐骨神經(jīng)—腓腸肌標本標本的制作方法；

　　3、觀察不同刺激頻率對骨骼肌收縮形式的影響。

　　二、基本原理

　　蛙類動物的某些基本活動，如神經(jīng)的生物電活動、肌肉收縮等與哺乳動物相似。其離體組時所需的生活條件比較簡單，易于控制和掌握，而且動物來源豐富，因此在生理實驗中常用蛙類的坐骨神經(jīng)—腓腸肌標本和坐骨神經(jīng)標本來觀察組織的興奮性、刺激與反應(yīng)的規(guī)律以及骨骼肌收縮的特點等。肌肉受到一次閾上刺激而產(chǎn)生的一次收縮為單收縮，其過程可分為三個時相，即潛伏期、縮短期和舒張期。肌肉受到連續(xù)的閾上刺激時，如果刺激間隔小于單收縮的過程，相鄰兩單收縮的時相會出現(xiàn)融合，表現(xiàn)為強直收縮現(xiàn)象。如果表現(xiàn)為每次收縮的開始發(fā)生在上次收縮的縮短期，稱完全強直收縮，如果表現(xiàn)為每次收縮的開始發(fā)生在上次收縮的舒張期，稱不完全強直收縮。使用生物信號采集處理系統(tǒng)，可以觀察到腓腸肌收縮的情況。

　　三、實驗材料

　　實驗動物：健康青蛙一只；

　　實驗器材和藥品：蛙類手術(shù)器械一套（粗剪刀一把，組織剪一把，眼科剪一把，鑷子一把，探針一根、玻璃分針2把，蛙釘4個、培養(yǎng)皿一個，蛙板一個、滴管一個、棉線若干），張力換能器，肌槽，刺激電極，鐵架臺，生物信號采集處理系統(tǒng)，微機，任氏劑。

　　四、實驗步驟

　　搗毀蟾蜍腦脊髓：取蟾蜍一只，用自來水沖洗干凈。左手握蛙，用食指下壓頭部前端，拇指按壓背部，使頭前俯。中指與無名指夾其前肢，無名指與小指夾其后肢，使整個軀干做最大屈曲。把探針自枕骨大孔處垂直刺入，到達椎管，即將探針改變方向刺入顱腔，向各側(cè)不斷攪動，徹底搗毀腦組織；再將探針原路退出，刺向尾側(cè)，捻動探針使其逐漸刺入整個椎管內(nèi)，完全徹底搗毀脊髓。脊髓破壞完全的標志是：下頜呼吸運動消失，反射消失，四肢松軟。

　　剪除軀干上部和內(nèi)臟，去皮，制備下肢標本：用粗剪刀在骶髂關(guān)節(jié)前1厘米處剪斷脊柱，握住蟾蜍下肢，沿軀干兩側(cè)（避開坐骨神經(jīng)）剪開腹壁。此時軀干上部及內(nèi)臟即全部下垂。剪除全部軀干及內(nèi)臟組織。剪去肛周皮膚；用圓頭鑷子夾住脊柱，注意不要碰到坐骨神經(jīng)，捏住皮膚邊緣，逐步向下牽拉剝離皮膚。將全部皮膚剝除后，把標本置于盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。

　　洗凈雙手和用過的全部手術(shù)器械。

　　分離兩下肢：避開坐骨神經(jīng)，用粗剪刀從背側(cè)剪去骶骨，然后沿中線將脊柱剪成左右兩半，再從恥骨聯(lián)合中央剪開，將已分離的標本浸入盛有任氏液的培養(yǎng)皿中。

　　取出一下肢，用蛙釘固定于蛙板上，固定時要注意，坐骨神經(jīng)和腓腸肌朝上。先用玻璃分針沿脊柱側(cè)游離坐骨神經(jīng)腹腔部，然后循股二頭肌和半膜肌之間的坐骨神經(jīng)溝，縱向分離暴露坐骨神經(jīng)之大腿部分直至腘窩，在分離過程中，把神經(jīng)周圍的結(jié)締組織去除干凈，并把神經(jīng)的細小分支剪斷，但要注意不要用金屬器械碰觸神經(jīng)，也不要對神經(jīng)過度牽拉。實驗期間應(yīng)不斷滴加任氏液使神經(jīng)保持濕潤。

　　用玻璃分針游離腓腸肌，并在下面穿線，在跟腱處打結(jié)。在結(jié)扎線的下方剪斷跟腱，在膝關(guān)節(jié)處把除腓腸肌外的小腿其他部分剪除。注意保持完整的腓腸肌。

　　用棉線在靠近脊柱的位置結(jié)扎坐骨神經(jīng)，并在結(jié)扎線的上方剪斷神經(jīng)，用眼科剪剪斷坐骨神經(jīng)的全部分

　　支。從腘窩處開始剪掉大腿所有的肉，盡量把股骨刮干凈，在膝關(guān)節(jié)上至少1cm處剪去上段股骨。將標本浸入任氏劑的培養(yǎng)皿中。

　　實驗裝置與儀器連接：1、將標本股骨殘端固定在肌槽上的小孔內(nèi)；2、將結(jié)扎腓腸肌肌腱的棉線與張力換能器連接，調(diào)節(jié)棉線的松緊，要與桌面垂直；3、將神經(jīng)置于肌槽的刺激電極上，用任氏劑保持標本濕潤；4、刺激電極插入微機上的刺激輸入孔；5、張力換能器與微機相應(yīng)通道相連。

　　打開電腦，進入生物信號采集處理系統(tǒng)，在菜單欄選擇“實驗項目”》“神經(jīng)肌肉”》“刺激強度與反應(yīng)的關(guān)系實驗?zāi)�塊”點擊開始，調(diào)節(jié)刺激參數(shù)，使頻率自動逐漸遞增，串間隔為2、連續(xù)記錄不同頻率時的肌肉收縮曲線。

　　五、結(jié)果與分析

　　不同頻率刺激對肌肉收縮的影響：串間隔為2,頻率增量為1時的張力變化（如圖）可見單收縮、不完全強直收縮、完全強直收縮。

　　分析：刺激強度到達閾刺激時腓腸肌開始收縮，在最大刺激收縮力前隨刺激強度增大而增大，到達最大刺激強度后，收縮力不發(fā)生明顯改變；在最大刺激強度條件下，某較小頻率使腓腸肌發(fā)生單收縮(如圖中第一次刺激)，頻率增大到，單收縮變?yōu)椴煌耆珡娭笔湛s（如圖中第26次刺激），頻率繼續(xù)增大，不完全強直收縮變?yōu)橥耆珡娭剖湛s（如圖中第7、8次刺激）。不同的腓腸肌其閾刺激，最大刺激均存在差異；其單收縮，不完全強直收縮和完全強直收縮所要頻率也不盡相同。

　　六、實驗總結(jié)

　　本次試驗嚴格按照操作步驟進行，所得實驗結(jié)果較為理想，很容易觀察到腓腸肌的單收縮、不完全強直收縮、完全強直收縮現(xiàn)象。在實驗的過程中，制備坐骨神經(jīng)腓腸肌標本是最繁瑣的步驟，也是實驗成功的關(guān)鍵所在，期間，我們進行的比較緩慢，生怕弄錯了哪一步，一步步想原理、回憶老師是怎么說的，所幸的是我們最終成功了，得到了較好的結(jié)果，在這次的不斷嘗試和思考中，很好地鍛煉了我們的動手能力和思維能力。

　　離體蛙心灌流

　　一、【目的要求】

　　1、學(xué)習斯氏離體蛙心灌流法;

　　2、了解心肌的生理特性;

　　3、觀察Na+,K+,Ca2+及腎上腺素(Adr),乙酰膽堿(ACh)等對離體心臟活動的影響。

　　二、【原理】

　　將離體蛙心（失去神經(jīng)支配的蛙心）保持在適宜的環(huán)境中，在一定的時間內(nèi)仍然能夠保持節(jié)律性收縮，心臟正常的節(jié)律性活動需要一個適宜的理化環(huán)境，離體心臟也是如此，離體心臟脫離了機體的神經(jīng)支配和全身體液因素的直接影響，可以通過改變灌流液的某些成分，觀察其對心臟活動的作用。心肌細胞的自律性、興奮性、傳導(dǎo)性及收縮性，都與鈉、鉀及鈣等離子有關(guān)。血鉀濃度過高時（高于7.9mmol/L），心臟興奮性、自律性、傳導(dǎo)性及收縮性都下降，表現(xiàn)為收縮力減弱、心動過緩和傳導(dǎo)阻滯，嚴重時心臟可停搏于舒張期。血鈣濃度升高時，心臟收縮力增強，過高可使心室停搏于收縮期。血鈣濃度降低，心肌收縮力減弱。血中鈉離子濃度的輕微變化，對心肌影響不明顯，只有發(fā)生明顯變化時，才會影響心肌的生理特性。腎上腺素可使心率加快、傳導(dǎo)加快及心肌收縮力增強，乙酰膽堿則與腎上腺素的作用相反。

　　三、【實驗儀器】

　　青蛙、常用手術(shù)器械、蛙板(或蠟盤)、蛙心夾、計算機采集系統(tǒng)、張力傳感器、支架、雙凹夾、雙針形露絲刺激電極、滴管、培養(yǎng)皿(或小燒杯)、紗布、棉線、橡皮泥、任氏液。蛙心套管(斯氏套管或八木氏套管)、套管夾、0.65％NaCl、5％NaCI.2％CaCl2.1％KCl.1：5 000腎上腺素、1：10 000乙酰肌堿、300U／mL肝素。

　　四、【方法與步驟】

　　1、斯氏蛙心插管法

　�。�1）一只青蛙，雙毀髓后背位置于蠟盤中，按前面的方法暴露心臟。仔細識別心臟周圍的大血管(見右圖)。在左主動脈下方穿一線，于動脈圓錐處結(jié)扎(動物個體小時，結(jié)扎位置可靠上些)。再從左右兩主動脈下方穿一線，并打一活結(jié)備用。左手提起主動脈上的結(jié)扎線，右手用眼科剪在結(jié)扎線下方、沿向心方向?qū)�動脈上壁剪一斜口。選擇大小適宜的蛙心套管，然后將盛有少量(套管內(nèi)2～3 cm高度)任氏液(內(nèi)加入一滴肝素溶液)的斯氏蛙心套管，山開口處插入動脈圓錐(見右圖)。當套管尖端到達動脈圓錐基部時，應(yīng)將套管稍稍后退，使尖端向動脈圓錐的背部后下方及心尖方向推進，經(jīng)主動脈瓣插入心室腔內(nèi)(于心室收縮時插入，但不可插得過深，以免心室壁堵住套管下口)。此時可見套管中血液沖人套管，并使液面隨心臟搏動而亡下移動，表明操作成功(否則需退回并重新插入)。用滴管吸去套管中的血液，更換新鮮任氏液。穩(wěn)定住套管后，輕輕提起備用線，將左、右主動脈連同插入的套管用雙結(jié)扎緊(不得漏液)，再將結(jié)線固定在套管的小玻璃鉤上，然后剪斷結(jié)扎線上方的血管。輕輕提起套管和心臟，看清靜脈竇的位置，于靜脈竇下方剪斷有牽連的組織，僅保留靜脈竇與心臟的聯(lián)系，使心臟離體(切勿損傷靜脈竇)。用任氏液反復(fù)沖洗心室內(nèi)余血，使套管內(nèi)灌流液不再有殘留血液。保持套管內(nèi)液面高度一致(1.5～2 cm)，即可進行實驗。

　�。�2）將插好離體心臟的套管固定在支架上，用蛙心夾夾住少許心尖部肌肉(不可夾得過多，以免因夾破心室而漏液)。再將蛙心夾上的系線繞過一個滑輪與張力傳感器相連（如右圖）。注意：勿使灌流液滴到傳感器上。調(diào)節(jié)顯示器上心臟收縮曲線的幅度適中。

　　2、實驗觀察

　　(1)記錄正常心搏曲線

　　(2)改用0、65％NaCI溶液灌流，并作好加藥標記，觀察心搏變化。待曲線氏插管裝置出現(xiàn)明顯變化時，立即吸去套管中的灌流液，同時做好沖洗標記，并用新鮮任氏液清洗2—3次，待心搏恢復(fù)正常。注意：換液時切勿碰套管，以免影響描記曲線的基線，同時保持灌流液面一致(以下同)。觀察可得，NaCI溶液會阻遏心臟搏動。

　　(3)迅速用新鮮任氏液清洗2～3次，待心搏恢復(fù)正常。向套管內(nèi)加入1～3滴2％CaCI：溶液，觀察并記錄心搏曲線的變化。當出現(xiàn)明顯變化時，立即更換任氏液，待心搏恢復(fù)正常(如果恢復(fù)遲緩，可多次沖洗)。

　　(4)同法向套管中加1—2滴1％KCl溶液，記錄心搏曲線的變化。當心搏曲線變化時，同法更換灌流液，待心搏恢復(fù)正常。

　　(5)同法記錄套管中加入l～2滴的腎上腺素溶液(1：10 000)后心搏曲線的變化。

　　(6)同法記錄套管中加入1—2滴乙酰膽堿溶液(1：10 000)后心搏曲線的變化。

　　五、【實驗結(jié)果與原因分析】

　　曲線的幅度————收縮的程度

　　曲線的密度————心率

　　曲線的基線————舒張的程度

　　1、正常收縮曲線圖

　　分析：

　　2、滴加含鈉離子溶液圖

　　分析：滴加Na離子溶液后，心跳減弱，這種現(xiàn)象出現(xiàn)的原因是由于灌注液中缺乏Ca2+，當Na＋明顯增高時，膜內(nèi)外鈉離子的濃度梯度增大，因此，細胞Na離子內(nèi)流加快，去極速

　　2＋度和幅度均增加，導(dǎo)致傳導(dǎo)性和自律性增高。同時，Na離子內(nèi)流的增多促進細胞內(nèi)Ca的

　　2＋外運使細胞內(nèi)Ca濃度降低，因此，心肌收縮能力減弱。

　　3、滴加2%CaCl溶液

　　分析：細胞外Ca2＋在細胞膜上對Na＋內(nèi)流有競爭性抑制作用，稱為膜屏障作用。[Ca2＋]增高時，Na＋內(nèi)流受抑制，細胞0期除極速度與幅度減小，使興奮性及傳導(dǎo)性均降低。[Ca2＋]增高使Ca2＋內(nèi)流增多，因此慢反應(yīng)細胞0期去極化加快加強，傳導(dǎo)性增高，而快反應(yīng)細胞平臺期縮短，有效不應(yīng)期縮短，復(fù)極加速。Ca2＋內(nèi)流增多，使心肌收縮能力增強。[Ca2＋]降低時，所引起的變化與高鈣時相反。因此加入CaCl2后，心率減少、振幅減少，基線上移。

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