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生物化妝品檢測
篇一:化妝品微生物檢測
不同品牌的化妝品中微生物污染狀況檢測
[目的要求]
1、學(xué)會化妝品中菌落總數(shù)及霉菌、酵母總數(shù)的檢測方法及檢測原理;
2、檢測市場上一些化妝品的微生物是否超標;
[實驗原理]
任何一種化妝品或藥物,在生產(chǎn)、保存、運輸和使用過程中,由于各種不同的原因,其產(chǎn)品質(zhì)量可能發(fā)生質(zhì)變。這些原因其一就是由所謂微生物所造成的,微生物是一群形體極微小的生物,它一般包括細菌、酵母菌、霉菌和病毒等;瘖y品或藥物受到微生物的污染,可引起產(chǎn)品物理性狀(如色澤、氣味等)變化,改變產(chǎn)品有效成份,有的還會引起致敏、毒素和病毒感染,因此必須嚴格控制化妝品或藥物中的微生物。菌落總數(shù)是指檢樣經(jīng)過處理,在一定條件下培養(yǎng)后(如培養(yǎng)基成分,培養(yǎng)溫度,培養(yǎng)時間,pH值,需氧性質(zhì)等),1g(1mL)檢樣中所含菌落的總數(shù)。所得結(jié)果只包括一群本方法規(guī)定的條件下生長的嗜中溫的需氧性菌落總數(shù)。
霉菌和酵母菌總數(shù)是指檢樣在一定條件下培養(yǎng)后,1g或1mL化妝品中所污染的活的霉菌和酵母菌菌落總數(shù),藉以判(轉(zhuǎn)載于:l裝無菌生理鹽水;9ml裝無菌生理鹽水;9cm滅菌平板,錐形瓶,玻璃涂棒,移液槍;Tip頭;培養(yǎng)箱;水浴鍋;無菌棉簽;超凈工作臺;高壓蒸汽滅菌鍋等。
[實驗步驟]
一、化妝品的微生物學(xué)污染狀況檢測
1、樣品采集
按無菌方法隨機抽取各種品牌牙膏、成人護扶品(膏、霜、洗面奶、爽膚水、粉餅等)、嬰幼兒用護扶品(爽身粉、面霜等)。
2、樣品預(yù)處理
在化妝品中通常都加入了防腐劑,使化妝品能較長時間使用而不腐敗變質(zhì),因此在進行化妝品衛(wèi)生細菌學(xué)檢驗時,必須消除化妝品中的防腐劑,使長期處于瀕死狀態(tài)或半損傷狀態(tài)的細菌被檢出,從而得出正確的檢驗結(jié)果。
消除防腐劑抑菌作用的方法,常用的方法有:
。1)稀釋法:用稀釋液和培養(yǎng)基將樣品稀釋到一定濃度,使其抑菌成分的濃度減少到無抑菌作用的程度,再進行檢驗。
(2)中和法:在供試液或培養(yǎng)基中加入中和劑,以中和防腐劑的抑菌效果。防腐劑種類不同所用的中和劑亦不同。本實驗采用吐溫80+卵磷脂來做中和劑。
3、樣品的制備
(1)液體樣品
1水溶性的液體樣品,量取10mL加到90mL滅菌生理鹽水中,混勻后,制成1:10檢液○
2油性液體樣品,取樣品10mL,先加5mL滅菌液體石蠟混勻,再加10mL滅菌的吐溫80,在40℃~○
44℃水浴中振蕩混合10min,加入滅菌的生理鹽水75mL(在40℃~44℃水浴中預(yù)溫),在40℃~44℃水浴中乳化,制成1:10的懸液。
。2)膏,霜,乳劑半固體狀樣品
1親水性的樣品,稱取10g,加到裝有玻璃珠及90mL滅菌生理鹽水的三角瓶中,充分振蕩混勻,靜置○
15min。.取其上清液作為1:10的檢液。
2疏水性樣品,稱取10g,放到滅菌的研缽中,加10mL滅菌液體石蠟,研磨成粘稠狀,再加入10mL滅○
菌吐溫80,研磨待溶解后,加70mL滅菌生理鹽水,在40℃~44℃水浴中充分混合,制成1:10檢液。
(3)固體樣品,稱取10g,加到90mL滅菌生理鹽水中,充分振蕩混勻,使其分散混懸,靜置后,取上清液作為1:10的檢液。
如有均質(zhì)器,上述水溶性膏,霜,粉劑等,可稱10g樣品加入90mL滅菌生理鹽水,均質(zhì)1min~2min;疏水性膏,霜及眉筆,口紅等,稱10g樣品,加10mL滅菌液體石蠟,10mL滅菌吐溫80,70mL滅菌生理鹽水,均質(zhì)3min~5min。
4、菌落總數(shù)檢驗
(1)用滅菌吸管吸取1:10稀釋的檢液2mL,分別注入到兩個滅菌平皿內(nèi),每皿1mL。另取1mL注入到9mL滅菌生理鹽水試管中(注意勿使吸管接觸液面),更換一支吸管,并充分混勻,制成1:100檢液,各吸取1mL,分別注入到兩個滅菌平皿內(nèi)。如樣品含菌量高,還可再稀釋成1:1000,1:10000,……等,每種稀釋度應(yīng)換1支吸管。
。2)將融化并冷至45℃~50℃的卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注到平皿內(nèi),每皿約15mL,隨即轉(zhuǎn)動平皿,使樣品與培養(yǎng)基充分混合均勻,待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿,置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h。另取一個不加樣品的滅菌空平皿,加入約15mL卵磷脂吐溫80營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿,置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h,為空白對照。
5、霉菌和酵母菌數(shù)的檢測
取1:10的檢液各1mL分別注入2個滅菌平皿內(nèi),(若菌量較多時可順序再做10倍稀釋),另取1個滅菌空平皿(作空白對照),每皿分別注入融化并冷至45℃左右的虎紅培養(yǎng)基約15mL,充分搖勻。凝固后,翻轉(zhuǎn)平板,置28℃培養(yǎng)箱,培養(yǎng)3天,計數(shù)平板內(nèi)生長的霉菌和酵母菌數(shù)。若有霉菌蔓延生長,為避免影響其它霉菌和酵母菌的計數(shù)時,于48h應(yīng)及時將此平板取出計數(shù)。
6、菌落計數(shù)方法
。1)菌落總數(shù)技術(shù)
先用肉眼觀察,點數(shù)菌落數(shù),然后再用放大5~10倍的放大鏡檢查,以防遺漏。記下各平皿的菌落數(shù)后,求出同一稀釋度各平皿生長的平均菌落數(shù)。若平皿中有連成片狀的菌落或花點樣菌落蔓延生長時,該
平皿不宜計數(shù).若片狀菌落不到平皿中的一半,而其余一半中菌落數(shù)分布又很均勻,則可將此半個平皿菌落計數(shù)后乘以2,以代表全皿菌落數(shù)。
。2)霉菌和酵母菌菌落計數(shù)
先點數(shù)每個平板上生長的霉菌和酵母菌菌落數(shù),求出每個稀釋度的平均菌落數(shù)。判定結(jié)果時,應(yīng)選取菌落數(shù)在20~100個范圍之內(nèi)的平皿計數(shù),乘以稀釋倍數(shù)后,即為每g(或每mL)檢樣中所含的霉菌和酵母菌數(shù)。其它范圍內(nèi)的菌落數(shù)報告應(yīng)參照菌落總數(shù)的報告方法報告之。
每g(或每mL)化妝品含霉菌和酵母菌數(shù)以CFU/g(mL)表示。
7、評定標準
化妝品的微生物學(xué)質(zhì)量應(yīng)符合下述規(guī)定:
。1)眼部、口唇、口腔粘膜用化妝品以及嬰兒和兒童用化妝品細菌總數(shù)不得大于500/ml或500/g。
(2)其它化妝品細菌總數(shù)不得大于1000/ml或1000/g。
[注意事項]
。1)所采集的樣品,應(yīng)具有代表性,一般視每批化妝品數(shù)量大小,隨機抽取相應(yīng)數(shù)量的包裝單位。檢驗時,應(yīng)分別從兩個包裝單位以上的樣品中共取10g或10ml。包裝量小的樣品,取樣量可酌減。
(2)供檢樣品,應(yīng)嚴格保持原有的包裝狀態(tài)。容器不應(yīng)有破裂,在檢驗前不得啟開,以防再污染。
。3)制成供試液后,應(yīng)盡快稀釋,注皿。一般稀釋后應(yīng)在1小時內(nèi)操作完畢。
(4)注意抑菌現(xiàn)象。由于防腐劑未被中和,往往使平板計數(shù)結(jié)果受影響,如低稀釋時菌落少。而高釋釋度時菌落數(shù)反而增大。
。5)在檢驗過程中,從開封到全部檢驗操作結(jié)束,均須防止微生物的再污染和擴散,所用器皿及材料均應(yīng)事先滅菌,全部操作應(yīng)在無菌室內(nèi)進行;蛟谙鄳(yīng)條件下,按無菌操作規(guī)定進行。
二、口服藥物的微生物學(xué)污染狀況檢測
1、樣品采集
按無菌方法隨機抽取各種品牌牙膏、成人護扶品(膏、霜、洗面奶、爽膚水、粉餅等)、嬰幼兒用護扶品(爽身粉、面霜等)。
2、樣品的制備
按無菌方法取藥粒10g或10ml投入到裝有90ml的無菌生理鹽水中,搖動至完全溶解,即為1:10樣品液,按前述方法相應(yīng)可制備1:100、1:1000的稀釋液。
2、菌落總數(shù)檢驗
將融化并冷至45℃~50℃的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基傾注到平皿內(nèi),每皿約15mL,隨即轉(zhuǎn)動平皿,使樣品與培養(yǎng)基充分混合均勻,待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿,置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h。另取一個不加樣品的滅菌空平皿,加入約15m營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基,待瓊脂凝固后,翻轉(zhuǎn)平皿,置37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)48h,為空白對照。
4、霉菌和酵母菌數(shù)的檢測
取1:10的檢液各1mL分別注入2個滅菌平皿內(nèi),(若菌量較多時可順序再做10倍稀釋),另取1個滅菌
空平皿(作空白對照),每皿分別注入融化并冷至45℃左右的虎紅培養(yǎng)基約15mL,充分搖勻。凝固后,翻轉(zhuǎn)平板,置28℃培養(yǎng)箱,培養(yǎng)3天,計數(shù)平板內(nèi)生長的霉菌和酵母菌數(shù)。若有霉菌蔓延生長,為避免影響其它霉菌和酵母菌的計數(shù)時,于48h應(yīng)及時將此平板取出計數(shù)。
5、評定標準
口服生化藥品衛(wèi)生標準:細菌總數(shù)<1000cfu/g,霉菌數(shù)<100cfu/g
[實驗報告]
1、分別將實驗測出的樣品數(shù)據(jù)以表格方式報告結(jié)果。(水、食品各1個表格)
2、對樣品菌落總數(shù)作出是否符合衛(wèi)生要求的結(jié)論。
[思考題]
從你所檢測的化妝品和藥物的各指標的結(jié)果來看,是否符合國家的衛(wèi)生標準?如果有超標情況,你認為主要由哪些因素造成?
篇二:生物化妝品
生物化妝品
概述
生物化妝品是指把現(xiàn)代生物工程技術(shù)應(yīng)用到化妝品中,利用基因重組技術(shù),體外獲得具有生物效應(yīng)的生物活性因子。和原始化妝品相比,它更強調(diào)功能性、安全性、親和性,從根本上調(diào)理和改善皮膚健康狀態(tài)。
發(fā)展歷程生物技術(shù)這門學(xué)科在20世紀70年代興起,在21世紀蓬勃發(fā)展,自從DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)后,生物可以說給人來掀起了一場革命,經(jīng)過幾十年的技術(shù)積累,生物技術(shù)已經(jīng)廣泛滲透于能源、醫(yī)療、農(nóng)業(yè)和環(huán)境等相關(guān)學(xué)科領(lǐng)域中,并逐步的實施到人們的日常生活。同樣,在21世紀的今天現(xiàn)代生物技術(shù)的飛速發(fā)展和廣泛應(yīng)用也給化妝品行業(yè)帶來了全新的發(fā)展機遇。
化妝品經(jīng)歷了一個漫長的過程,從油脂類這種單純的物理防護到油水混合乳化護膚,而添加木瓜、人參、蘆薈等這些天然植物的提取物是一大跨越,不過新的時代已經(jīng)來臨,從上世紀末,美、法等國家已經(jīng)開始把生物技術(shù)應(yīng)用化妝品中,生物美容時代算是革命性的進展,其本質(zhì)區(qū)別是作用目標更加明確,利用生物活性因子在分子水平上對受損細胞進行修復(fù)和調(diào)整,改善其組織和代謝,促進皮膚細胞生長,調(diào)節(jié)皮膚平衡,從根本上達到保健皮膚、保持青春的目的。
什么是生物活性因子
生物活性因子主要通過基因表達技術(shù),歷經(jīng)發(fā)酵、純化等復(fù)雜工藝,嚴格控制各種雜志含量。天津強微特生物科技有限公司生產(chǎn)的生物蛋白因子,各項指標達到或超過中國藥典標準,根據(jù)高效液相色譜(HPLC)檢測,純度超過95%。以下是在護膚品中使用較多的三種蛋白因子:
人表皮生長因子(hEGF)/人寡肽1(Humanoligopeptide-1):
對受損皮膚、創(chuàng)傷皮膚和改建性皮膚具有良好的修復(fù)、護理作用。特別適用于美容手術(shù)后皮膚的護理和恢復(fù),有縮短創(chuàng)傷愈合時間和減少疤痕形成的作用。
促進皮膚各類細胞的新陳代謝,增強皮膚細胞對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收,減緩皮膚的衰老,改善皮膚的光澤。
促進蛋白合成,調(diào)節(jié)皮膚膠原蛋白的降解和更新,增強皮膚彈性,減少皮膚皺紋的形成,撫平皮膚已有的細紋。
防止和護理痤瘡。
堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)/人寡肽3(Humanoligopeptide-3):
改善細胞生長的微環(huán)境,促進彈性纖維和膠原蛋白的合成,使肌膚富有
彈性,是皮膚處于滑潤狀態(tài)。
促進成纖維細胞的生長發(fā)育,增強細胞的新陳代謝,減少皮膚皺紋的生成。降低皮膚細胞中黑色素和有色細胞的含量,減輕皮膚色素的沉積。
角質(zhì)形成細胞生長因子(KGF)/INCI名稱:人寡肽5(Humanoligopeptide-5):促進上皮細胞的增殖和分化,促進傷口愈合。
促進毛發(fā)再生。
促進膠原蛋白的合成,促進細胞外基質(zhì)的形成,增強皮膚的彈性和飽滿度,減少和消除皺紋。
進入生物美容時代的國外品牌1966年,LaMer海藍之謎面霜由于在配方中率先采用了用生物發(fā)酵技術(shù)處理海藻等營養(yǎng)物質(zhì)而獲得的MiracleBroth,歷經(jīng)50年,其神奇面霜依然受人們歡迎;
1997年,護膚品Revive(利維膚)品牌在美國始建,其創(chuàng)始人布朗博士由于在多種產(chǎn)品配方中采用生物活性蛋白EGF(人表皮生長因子)作為功能性原料,促使其產(chǎn)品抗衰老效果極其顯著,短短十年已位居美國頂級奢侈品之列,其明星產(chǎn)品PeauMagnifiqueYouthRecruit受到上層人士的青睞。
國內(nèi)目前還比較少,天津強微特生物科技公司算是一家,它由于是生物高科技起家,其旗下護膚品牌-芭睿芭睿品牌處處都活躍著生物元素,時空煥顏EGF禮盒依據(jù)專利技術(shù),自主研發(fā)生產(chǎn)EGF,經(jīng)真空凍干封存而成,長效保持活性,達到并超過進口化妝品有效物的含量和活性。
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